牦牛和犏牛Dmrt7基因序列分析及其在睾丸组织中的表达水平

• 作者: 刘建 包鹏甲 吴晓云 梁春年 郭宪 金帅 阎萍
• 来源期刊: 中国农业科学
• 关键词: 牦牛 犏牛 睾丸组织 Dmrt7基因 克隆 生物信息学分析 表达水平
• 年，卷（期）: 2013,（5）
• 所属期刊栏目: 畜牧·兽医·资源昆虫
• 页码范围: 1036-1043
• 语种: 中文
• DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2013.05.019

摘要

[目的]研究牦牛和犏牛Dmrt7基因编码区序列和编码蛋白的结构,以及在睾丸组织中mRNA及其蛋白表达水平,探讨Dmrt7与犏牛雄性不育的关系,为揭示犏牛雄性不育的分子机理提供依据.[方法]利用分子克隆技术获得牦牛和犏牛Dmrt7基因编码区序列,并采用生物信息学方法对该基因及其编码蛋白的功能位点和二级结构等方面进行了预测和分析；通过半定量PCR技术检测Dmrt7基因mRNA在牦牛各组织器官中的表达水平；利用实时荧光定量PCR技术检测牦牛和犏牛睾丸组织中Dmrt7基因mRNA表达水平；并通过western blotting检测牦牛和犏牛睾丸组织中Dmrt7蛋白的表达水平.[结果]牦牛和犏牛Dmrt7基因cDNA序列一致,包含一个长度为1 113bp的开放阅读框,编码370个氨基酸,具有完整的DM功能域,二级结构主要以无规则卷曲、α螺旋和延伸链为主.在牦牛各组织器官中,Dmrt7基因mRNA仅在睾丸组织中特异性表达.牦牛睾丸组织中Dmrt7mRNA和蛋白的表达水平极显著高于犏牛(P＜0.01).[结论]牦牛睾丸组织中Dmrt7基因mRNA和蛋白表达水平明显高于犏牛,且Dmrt7蛋白表达水平与其mRNA表达水平相一致.