小麦Fe超氧歧化酶基因的原核表达分析

• 作者: 李娟 杨利新 武立权 王泽文 王荣富 郑文寅
• 来源期刊: 西北植物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 小麦 Fe超氧歧化酶基因 原核表达
• 年，卷（期）: 2013,（11）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 2147-2152
• 页数: 6页
• 分类号: Q786
• 字数: 4802字
• 语种: 中文

摘要

采用RT-PCR技术分离小麦Fe超氧歧化酶基因(FeSOD)的ORF全长cDNA,然后构建其原核表达载体,并对其表达的诱导时间、IPTG浓度、温度进行优化,以期获得较大量的重组蛋白.结果表明:实验获得了小麦FeSOD基因的ORF全长(600 bp),ORF全长与原核表达载体pET-Dutel相连接构建了原核表达载体pET-FeSOD,将pET-FeSOD导入宿主菌Rosetta(DE3)中,经SDS-PAGE电泳结果显示,可以高效表达融合蛋白且表达的蛋白均主要以包涵体的形式存在;重组质粒表达出25.8 kD的融合蛋白,除去载体pET-Duet1自身表达的3.0 kD蛋白后,与FeSOD编码的约为22.8 kD蛋白的大小一致;对诱导表达条件的优化结果显示,融合蛋白pET-FeSOD最佳的诱导表达条件为:0.5 mmol/L的IPTG浓度,37℃诱导5h.该研究结果为进一步深入研究该基因的特性与功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王荣富	安徽农业大学生物技术中心	81	1328	17.0	33.0
2	郑文寅	安徽农业大学农学院	76	561	13.0	21.0
3	李娟	安徽农业大学生物技术中心	34	202	8.0	13.0
4	武立权	安徽农业大学农学院	57	563	13.0	22.0
5	王泽文	安徽农业大学生命科学学院	1	8	1.0	1.0
6	杨利新	安徽农业大学生命科学学院	2	13	2.0	2.0