Error-prone PCR致哈茨木霉几丁质酶突变的条件优化

• 作者: 李微 李景富 王傲雪 陈秀玲
• 来源期刊: 东北农业大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: Error-prone PCR 哈茨木霉几丁质酶 Chit42 突变
• 年，卷（期）: 2013,（10）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 134-138
• 页数: 5页
• 分类号: Q815
• 字数: 3733字
• 语种: 中文

摘要

运用Error-prone PCR对哈茨木霉几丁质酶基因(Chit42)进行人工突变.在常规PCR基础上,通过提高体系中Mg2+浓度,适当加入一定浓度Mn2+,调节四种dNTP(dATP、dGTP、dCTP、dGTP)浓度,得到产生明显突变效果的试验条件.在Error-prone PCR中,使用5.0 mmol· L-1 Mg2+,0.5 mmol·L-1 Mn2+,0.04 mmol·L-1 dATP和dGTP,1.5 mmol·L-1 dTTP和dCTP进行扩增后,随机挑选10个克隆测序,累积13 370个碱基,检测到57个突变,平均突变率为0.4％.为产生优良突变株、酶分子定向进化奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王傲雪	东北农业大学园艺学院	79	525	12.0	18.0
5	李景富	东北农业大学园艺学院	233	2750	21.0	42.0
6	陈秀玲	东北农业大学园艺学院	42	187	8.0	10.0
7	李微	东北农业大学园艺学院	8	9	2.0	2.0