非变性原位杂交技术在芝麻染色体识别上的探索与应用

• 作者: 刘艳阳 崔承齐 梅鸿献 武轲 郑永战
• 来源期刊: 中国农业科学
• 关键词: 芝麻 寡聚核苷酸 染色体 核型 ND-FISH
• 年，卷（期）: 2013,（17）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 3729-3735
• 语种: 中文
• DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2013.17.023

摘要

[目的]研究和确定芝麻ND-FISH最优试验条件,并对其在芝麻染色体识别中的可行性进行探索.[方法]以寡聚核苷酸(AC)8为探针,研究不同洗脱强度、酶解时间和杂交时间对ND-FISH的影响,确定芝麻ND-FISH最优试验方案.[结果]芝麻ND-FISH最优方案:制片在浓度100 μg·mL-1RNase A酶解1h,探针浓度6μL(20 ng·μL-1),杂交4h,4 × SSC/0.2％ Tween 20溶液洗脱10 min; 18条染色体存在(AC)8杂交信号,其中,14条染色体上存在较强杂交信号,4条染色体上有较弱杂交信号,结合染色体长度及臂比,18条染色体可有效识别.[结论]利用ND-FISH技术、以(AC)8为探针成功识别栽培芝麻的18条染色体.