iASPP真核表达载体构建及其功能鉴定

• 作者: 刘泽军 杨婷 杨益民 杨靓靓 蔡云 辛海明 陈杰
• 来源期刊: 重庆医学
• 关键词: P53凋亡刺激蛋白家族抑制成员 遗传载体 转染 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2013,（35）
• 所属期刊栏目: 论 著
• 页码范围: 4233-4235,4238
• 页数: 4页
• 字数: 3434字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8348.2013.35.001

摘要

目的：构建P53凋亡刺激蛋白（ASPP）家族的抑制成员iASPP的真核表达载体，并将其通过脂质体转染到结肠癌细胞株SW480及Lovo中，观察转染前后iASPP 表达变化及其对细胞凋亡的影响。方法将解放军第十六医院检验科经测序鉴定的pMD19-T-iASPP质粒亚克隆至真核表达质粒pcDNA3．1（＋），构建重组真核表达质粒pcDNA3．1（＋）-iASPP ，测序鉴定后用脂质体将重组质粒转染至结肠癌细胞株SW480及Lovo中，用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测iASPP的表达以及用流式细胞仪检测细胞凋亡的变化情况。结果重组表达质粒pcDNA3．1（＋）-iASPP ，经酶切测序与GenBank上记录的人iASPP cDNA序列（gi 60457962）完全一致。经pcDNA3．1（＋）-iASPP质粒转染的结肠癌细胞株SW480及Lovo的iASPP mRNA表达增高，细胞凋亡率下降。结论成功构建了重组表达质粒pcDNA3．1（＋）-iASPP ，并成功在结肠癌细胞株SW480及Lovo中获得了表达，细胞株的凋亡率下降，提示抑制iASPP高表达有可能成为恢复P53抑癌功能的新策略。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘泽军	第三军医大学西南医院国际合作实验室	58	178	8.0	10.0
2	蔡云	第三军医大学西南医院国际合作实验室	12	37	4.0	5.0
3	杨靓靓	解放军第十六医院检验科	11	68	2.0	8.0
4	陈杰	解放军第十六医院检验科	29	91	5.0	9.0
5	杨婷	解放军第十六医院检验科	13	52	4.0	7.0
6	辛海明	第三军医大学西南医院国际合作实验室	10	55	5.0	7.0
7	杨益民	解放军第十六医院检验科	4	1	1.0	1.0