香菇C91-3转录本Unigene 14872基因Pkinase结构域的克隆表达及其生物信息学分析

• 作者: 伦永志 刘奔 宁安红 张伟 曹靖 李星云 杜忠娟 王晓丽 钟民涛
• 来源期刊: 微生物学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 香菇C91-3 克隆 生物信息学 蛋白激酶
• 年，卷（期）: 2014,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 22-27
• 页数: 6页
• 分类号: Q943
• 字数: 3570字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-7021.2014.01.005

摘要

旨在克隆香菇C91-3转录本Unigene 14872基因中的Pkinase结构域,并对其进行生物信息学分析.提取香菇C91-3菌丝体中总RNA,根据转录组测序结果,用3'-Full RACE、5'-Full RACE方法获得Unigene 14872基因全长.用NCBI对其进行生物信息学分析,预测其具有丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(Pkinase)结构域.设计引物PCR扩增Pkinase结构域,然后克隆至pET32a(+)载体,再热转化至JM109中保存并进行质粒测序.重组质粒pET32a(+)-Pkinase构建成功,并成功诱导表达重组蛋白,初步鉴定该蛋白具有抗肿瘤活性,为进一步研究重组蛋白的活性及作用机制奠定基础.