广藿香MSAP分析技术体系的优化及引物筛选

• 作者: 卢慧娟 姬生国 熊燕 谢晖 郭艳婕 黄洁燕
• 来源期刊: 广东药学院学报
• 学科: 农学
• 关键词: 广藿香 DNA甲基化 甲基化敏感扩增多态性(MSAP) 表观遗传学
• 年，卷（期）: 2014,（1）
• 所属期刊栏目: 天然药物化学
• 页码范围: 28-35
• 页数: 8页
• 分类号: S567
• 字数: 7669字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-8783.2014.01.007

摘要

目的 首次利用甲基化敏感扩增多态性(MSAP)技术开展广藿香表观遗传多样性研究,建立并优化广藿香MSAP技术分析的反应体系.方法 对MSAP技术中关键的步骤,包括酶切反应中的酶切时间和基因组DNA酶切量,预扩增反应中连接产物的稀释倍数、选择性扩增中预扩增产物的稀释倍数等条件进行了优化.同时,利用优化的条件,对81对引物进行初步的多态性筛选.结果 分步酶切,以1 000 ng DNA量进行EcoRⅠ(30 U)酶切5 h,纯化反应产物,再各取15 μL的EcoRⅠ酶切纯化产物进行MspⅠ/HapⅡ(10 U)酶切5 h,可完全酶切.优化后的反应体系得到条带清晰、特异性好、背景涂布少的选择性扩增产物.结论 建立了MSAP反应体系,保证MSAP图谱稳定、清晰;初步筛选出的32对引物组合,可用于后续广藿香DNA甲基化模式的相关研究.同时,也为其他药用植物提供甲基化敏感扩增多态性研究的依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	谢晖	复旦大学药学院	18	88	5.0	8.0
2	姬生国	广东药学院中药学院	65	412	12.0	17.0
3	黄洁燕	广东药学院中药学院	11	58	4.0	7.0
4	卢慧娟	广东药学院中药学院	14	64	5.0	7.0
5	熊燕	云南中医学院中药学院	1	5	1.0	1.0
6	郭艳婕	复旦大学药学院	1	5	1.0	1.0