戊型肝炎病毒 ORF2截短蛋白 p154在毕赤酵母中的分泌性表达及其抗原性

• 作者: 孟继鸿 张建华 徐明杰
• 来源期刊: 东南大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 戊型肝炎病毒 毕赤酵母 中和免疫表位多肽 表达 抗原性
• 年，卷（期）: 2014,（5）
• 所属期刊栏目: 论 著
• 页码范围: 564-568
• 页数: 5页
• 分类号: R373.21|G782|Q784
• 字数: 4530字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-6264.2014.05.005

摘要

目的：利用毕赤酵母系统表达戊型肝炎病毒（HEV）ORF2编码蛋白第452～605氨基酸多肽（p154），探讨毕赤酵母表达系统用于研发戊型肝炎基因工程疫苗的可能性。方法：采集戊型肝炎患者粪便，进行RT-PCR检测和测序鉴定，并依此为模板扩增ORF2 p154基因，克隆到表达载体pPICZαA上，电转化入毕赤酵母宿主菌GS115，经筛选鉴定后将携带目的基因的重组克隆菌进行诱导表达，对表达产物进行SDS-PAGE和蛋白质印迹法分析。结果：利用基因重组技术构建了含HEV p154片段的pPICZαA重组质粒，并在毕赤酵母菌株GS115中实现了分泌性表达，表达的目的蛋白p154分子质量约为22 kDa，上清中p154表达量可达到200μg· ml -1。 p154可与HEV感染兔恢复期血清及HEV单克隆抗体6F9进行反应，表明酵母表达的p154具有良好的抗原性。结论：HEV ORF2 p154在毕赤酵母表达系统中得到了成功表达，为进一步研发真核表达的戊型肝炎基因工程疫苗奠定了实验基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孟继鸿	东南大学医学院	43	346	9.0	17.0
2	张建华	东南大学医学院	6	98	3.0	6.0
3	徐明杰	东南大学医学院	1	1	1.0	1.0