重组人降钙素原蛋白基因在sf9细胞中的表达

• 作者: 于源华 徐影 赵雪
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 降钙素原蛋白 sf9细胞 基因表达 抗原性
• 年，卷（期）: 2014,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 58-61
• 分类号: Q57|Q786
• 语种: 中文

摘要

目的 利用昆虫杆状病毒表达系统(Bac-to-Bac system)在sf9细胞中表达重组人降钙素原蛋白(procalcitonin,PCT).方法 将PCT基因克隆至转移载体pFastBacTM1中,构建重组转移载体pFB-PCT,将其与野生型多角体病毒Bacmid同源重组,获得重组杆状病毒穿梭质粒Bacmid-PCT,采用脂质体转染法将鉴定正确的重组杆状病毒穿梭质粒转染sf9细胞,收获P1杆状病毒Bac-PCT,经扩增获得P3代杆状病毒,感染sf9细胞,Western blot法检测重组PCT的抗原活性.结果 重组杆状病毒穿梭质粒经PCR及测序鉴定证明构建正确;已成功转染人sf9细胞,P3杆状病毒滴度为1.2×108 pfu/ml;重组人PCT可被小鼠抗降钙素原单克隆抗体特异性识别,在相对分子质量约13 000处可见特异性条带.结论 已在sf9细胞中成功表达重组人PCT,表达产物具有抗原性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	于源华	长春理工大学生命科学院	110	396	10.0	14.0
2	徐影	长春理工大学生命科学院	8	25	2.0	5.0
3	赵雪	长春理工大学生命科学院	4	9	2.0	3.0