嗜碱芽孢杆菌Bacillus sp.N16-5表达载体的构建

• 作者: 刘文侠 李金山 薛燕芬 马延和 高成华
• 来源期刊: 微生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: Bacillus sp.N16-5 表达载体 嗜碱芽孢杆菌
• 年，卷（期）: 2014,（1）
• 所属期刊栏目: 方法
• 页码范围: 89-96
• 分类号: Q93-3
• 语种: 中文
• DOI: 10.13343/j.cnki.wsxb.2014.01.011

摘要

[目的]构建可以在嗜碱芽孢杆菌Bacillus sp.N16-5中表达外源基因的表达载体.[方法]以枯草芽孢杆菌表达质粒pHCMC04为基本骨架,删除木糖诱导的启动子和木糖阻遏蛋白基因,分别插入枯草芽孢杆菌组成型强启动子P43和嗜碱芽孢杆菌N16-5的组成型启动子PEF,构建表达载体pABN165P43和pABN165PEF;将绿色荧光蛋白基因gfp作为报告基因连接至表达载体得到pABN 165 P43-gfp和pABN165PEF-gfp,利用原生质体转化法将其转化至Bacillus sp.N16-5,通过荧光显微镜和多功能荧光读板仪检测报告基因的表达情况.[结果]所构建的表达载体pABN165P43-gfp和pABN165PEF-gfp可以在Bacillus sp.N16-5中表达报告基因gfp,荧光定量数据显示,在7.5h左右开始检测到绿色荧光蛋白的表达,从7.5h到12h荧光强度随时间增长迅速并在12h左右达到最大,最大荧光值在7000左右.[结论]成功构建了2个嗜碱芽孢杆菌Bacillus sp.N16-5表达载体,实现了外源基因在嗜碱芽孢杆菌中的表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	马延和	中国科学院微生物研究所	59	805	14.0	26.0
2	薛燕芬	中国科学院微生物研究所	17	372	11.0	17.0
3	高成华	中国科学院微生物研究所	3	13	2.0	3.0
4	刘文侠	中国科学院微生物研究所	1	2	1.0	1.0
8	李金山	中国科学院微生物研究所	2	9	2.0	2.0