犬新孢子虫AMA1基因重组猫疱疹病毒1型转移载体的构建及真核表达

• 作者: 张守发 贾洪林 贾立军 郭焕平 高洋
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 犬新孢子虫 NcAMA1基因 猫疱疹病毒1型(FHV1)转移质粒 表达
• 年，卷（期）: 2014,（8）
• 页码范围: 829-832
• 页数: 4页
• 分类号: S852.723
• 语种: 中文

摘要

为构建犬新孢子虫AMA1基因重组猫疱疹病毒1型(FHVl)转移质粒pBS-TK-NcAMA1,并在真核细胞中表达,以重组质粒pVAX1-NcAMA1为模板,扩增犬新孢子虫AMA1基因,并将其亚克隆至重组质粒pBS-TK.通过转染试剂PEI将pBS-TK-NcAMA1转移载体转染至293T细胞,以制备的小鼠抗犬新孢子虫AMA1蛋白的特异性抗体为一抗,应用间接免疫荧光试验和Western-blot对基因的表达情况进行鉴定.结果显示,构建的病毒转移载体pBS-TK-NcAMA1可以在293T细胞内获得表达,表达蛋白的分子质量为68 ku.这一研究成果为犬新孢子虫AMA1基因的重组猫疱疹病毒1型载体疫苗的研制奠定了基础.