抗新城疫病毒HN蛋白单链抗体的原核表达及其功能鉴定

• 作者: 修金生 刘培欣 刘恒贵 李涛 王斌 王高玲 胡崇伟
• 来源期刊: 中国预防兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 单链抗体 新城疫病毒 血凝素-神经氨酸酶
• 年，卷（期）: 2014,（5）
• 所属期刊栏目: 免疫学
• 页码范围: 383-386
• 页数: 4页
• 分类号: S852.65
• 字数: 2959字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-0589.2014.05.12

摘要

为制备抗鸡新城疫病毒(NDV)血凝素-神经氨酸酶(HN)单链抗体(scFv)并鉴定其生物学功能,本研究提取抗NDV HN单克隆抗体杂交瘤细胞株总RNA,通过RT-PCR扩增抗HN蛋白抗体的轻链可变区(VL)和重链可变区(VH)编码序列,将其插入含有Linker序列的载体pET-scIG中,构建抗HN的scFv (HN-scFv)原核表达重组质粒pET-HN-scFv并在大肠杆菌中诱导表达.结果显示HN-scFv主要以包涵体形式存在.将包涵体进行复性和Ni-NTA层析柱纯化后用于流式细胞仪检测,结果显示复性纯化后的HN-scFv能够识别表达于293T细胞表面的NDV HN蛋白.该scFv的制备为进一步对该抗体进行改造奠定了基础.