食品中伤寒沙门氏菌TaqMan探针实时PCR检测方法

• 作者: 刘洋 史媛媛 曹冬梅 曹际娟 袁慕云 许龙岩
• 来源期刊: 检验检疫学刊
• 学科: 医学
• 关键词: 实时荧光PCR 伤寒沙门氏菌 快速鉴定
• 年，卷（期）: 2014,（3）
• 页码范围: 32-36
• 页数: 5页
• 分类号: R155.5

摘要

建立实时荧光PCR快速鉴定伤寒沙门氏菌（Salmonella Typhi）的方法。根据GenBank公布的伤寒沙门氏菌基因序列,设计引物和Taqman探针,采用实时荧光PCR进行特异性、灵敏性及模拟样品的检测实验。结果表明,特异性引物和探针可从31株伤寒沙门氏菌菌株、27株其他血清型沙门氏菌和7株非沙门氏菌菌株中鉴定出全部的31株伤寒沙门氏菌。以伤寒沙门氏菌梯度稀释菌液DNA为模板进行实时荧光PCR扩增,菌株模板浓度与Ct值呈良好线性关系,线性系数为0.994,扩增效率为94.5%,最低检测浓度为4cfu/mL的添加浓度。实时荧光PCR检测与传统方法相比较,两者结果一致。该方法特异性好、灵敏度高,可以快速鉴定伤寒沙门氏菌。