感染环形泰勒虫裂殖体的牛淋巴细胞酵母双杂交文库的构建

• 作者: 任巧云 关贵全 刘志杰 刘爱红 岑双庆 李有全 杨吉飞 牛庆丽 陈泽
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 环形泰勒虫 牛淋巴细胞 酵母双杂交 cDNA文库
• 年，卷（期）: 2014,（7）
• 页码范围: 667-671
• 页数: 5页
• 分类号: S852.723
• 语种: 中文

摘要

为研究环形泰勒虫裂殖体与牛淋巴细胞之间的相互作用,以感染了环形泰勒虫裂殖体的淋巴细胞系为材料,构建了感染环形泰勒虫裂殖体的牛淋巴细胞系的酵母双杂交cDNA文库.首先,提取纯化细胞系的mRNA,经反转录合成第一条链cDNA,通过LD-PCR合成双链cDNA.柱层析剔除250 bp以下的小片段;将双链cDNA与经SmaⅠ处理过的文库质粒pGADT7-Rec一起转入到酵母Y187感受态细胞内,双链cDNA与文库质粒会发生同源重组,经过抗性筛选即可得到酵母双杂交cDNA文库.文库构建结果显示,该文库库容量达2.4×107 CFU,插入片段的平均长度在1 000 bp左右,达到试剂盒建库要求.