绵羊ApoER2基因克隆及其干扰质粒对睾丸共培养细胞硒蛋白表达的影响

• 作者: 任有蛇 张国林 张春香 赵辉 郭丽娜
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: ApoER 2克隆 siRNA质粒载体 睾丸共培养细胞 硒蛋白表达 绵羊
• 年，卷（期）: 2014,（8）
• 所属期刊栏目: 遗传繁育
• 页码范围: 1237-1245
• 页数: 9页
• 分类号: S826|Q786
• 字数: 4248字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2014.08.005

摘要

本研究旨在克隆绵羊ApoER2基因,构建ApoER2-siRNA质粒载体,研究ApoER2基因沉默对睾丸共培养细胞Sel P和PHGPx表达的影响.利用RT-PCR技术,克隆ApoER2序列,在此基础上构建4种pGPU6/GFP/Neo-ApoER2-siRNA质粒表达载体,利用脂质体将其转染到体外共培养绵羊睾丸细胞中,采用Real-time PCR和Western blotting方法,检测其抑制效应,并研究ApoER2基因沉默对Sel P和PHGPx mRNA表达的影响.本研究成功获得了长度为2 490 bp的绵羊睾丸ApoER2完整编码区序列,共编码892个氨基酸,绵羊ApoER2核苷酸序列与牛的同源性最高,相似性为97.7％.ApoER2-siRNA-1565和ApoER2-siRNA-2567位点重组质粒的干扰效果较好(P＜0.01),选取ApoER2 siRNA 2567重组质粒,结果显示转染组Sel P和PHGPx表达量显著降低(P＜0.01).获得了绵羊ApoER2编码区序列和有效抑制该基因表达的2个质粒载体,ApoER2沉默可能影响了睾丸硒蛋白Sel P和PHGPx的表达,为进一步研究ApoER2转运硒机理提供了理论依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	任有蛇	山西农业大学动物科技学院	150	714	13.0	18.0
2	郭丽娜	山西农业大学动物科技学院	29	200	9.0	13.0
3	张春香	山西农业大学动物科技学院	137	599	13.0	16.0
4	赵辉	山西农业大学动物科技学院	7	34	3.0	5.0
5	张国林	山西农业大学动物科技学院	10	49	4.0	6.0