猪干扰素调节因子7的克隆及原核表达

• 作者: 刘福涛 张雪梅 李宏基 杜丽丽 杨国宇 王江 郭豫杰
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪IRF7 基因克隆 原核表达
• 年，卷（期）: 2014,（8）
• 所属期刊栏目: 遗传繁育
• 页码范围: 1213-1217
• 页数: 5页
• 分类号: S828|S813.3
• 字数: 4392字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2014.08.002

摘要

为了进一步研究猪IRF7基因所编码蛋白质的生物学功能,本研究以猪十二指肠cDNA为模板扩增IRF7基因ORF区;将该基因克隆至原核表达载体pET-21b(+)中,获得pET-21b-IRF7重组质粒.经测序鉴定后,将重组质粒转化E.coli BL21 (DE3),IPTG诱导表达His-IRF7融合蛋白,并利用Western blot进行鉴定.结果表明:(1)成功克隆了1 461 bp IRF7ORF区;(2) His-IRF7融合蛋白在裂解菌液的上清和沉淀中均有表达,相对分子质量为60.5ku.结果提示,运用大肠杆菌表达系统成功表达IRF7融合蛋白,为猪IRF7基因相关功能研究提供了基础材料.