猪干扰素α－1基因的原核表达与多克隆抗体制备

• 作者: 刘娜 孙东波 李春秋 武瑞 王建发 王志慧 王欣宇 耿雨菲 苏明俊 高晶 魏姗
• 来源期刊: 畜牧与饲料科学
• 学科: 农学
• 关键词: 猪干扰素α-1 原核表达 抗体制备
• 年，卷（期）: 2014,（12）
• 所属期刊栏目: 基础科学
• 页码范围: 1-3,4
• 页数: 4页
• 分类号: Q78|S852.4
• 字数: 3241字
• 语种: 中文

摘要

[目的]利用大肠杆菌原核表达系统对猪干扰素α-1（PoIFNα-1）基因进行表达，制备PoIFNα-1重组蛋白多克隆抗体。[方法]根据GenBank发表的PoIFNα-1核苷酸序列，合成密码子优化的PoIFNα-1基因，构建PoIFNα-1基因的pET-28a原核表达载体，转化大肠杆菌BL21（DE3）宿主菌后，利用IPTG进行诱导表达。表达的PoIFNα-1重组蛋白纯化后，免疫昆明系小鼠，制备多克隆抗体。采用Western blot技术检测PoIFNα-1重组蛋白的多克隆抗体与天然PoIFNα-1的反应性。[结果]合成的PoIFNα-1基因在大肠杆菌BL21（DE3）宿主菌中成功表达，针对PoIFNα-1重组蛋白的多克隆抗体能够识别天然的猪干扰素α-1。[结论]合成的PoIFNα-1基因在大肠杆菌中获得了成功表达，为后续研究奠定了基础。