猪Ⅰ型干扰素受体Ⅱ胞外域基因的克隆表达及其多克隆抗体制备

• 作者: 夏平安 崔保安 张军杰 杨青原 王冬梅 秦运杰
• 来源期刊: 河南农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪Ⅰ型干扰素受体Ⅱ 胞外域 克隆 原核表达
• 年，卷（期）: 2013,（4）
• 所属期刊栏目: 畜牧兽医学
• 页码范围: 420-424
• 页数: 5页
• 分类号: S852
• 字数: 3911字
• 语种: 中文

摘要

为了克隆表达猪Ⅰ型干扰素受体Ⅱ胞外域(IFN2EC)基因,试验采用RT-PCR技术从健康仔猪肺巨噬细胞中扩增出猪Ⅰ型干扰素受体Ⅱ胞外域基因的cDNA序列,将其亚克隆到原核表达载体pET-32a中,并将阳性重组质粒转化BL21(DE3)菌株,IFN2EC重组蛋白得到高效表达.将融合蛋白IFNR2EC免疫BAL B/C小鼠,获得鼠抗IFN2EC融合蛋白多克隆抗体,将得到的融合蛋白多克隆抗体采用间接ELISA和Western-blotting试验方法检测.本研究成功构建重组表达质粒pET-IFNR2EC,ELISA测定多克隆抗体的效价为1∶12 800,Western-blotting试验结果表明,制备的鼠抗IFNR2EC融合蛋白多克隆抗体可以与融合蛋白进行特异性结合,从而证明融合蛋白具有很好的免疫原性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	崔保安	河南农业大学牧医工程学院	274	2313	25.0	33.0
2	夏平安	河南农业大学牧医工程学院	65	271	9.0	14.0
3	王冬梅	河南农业大学牧医工程学院	8	19	3.0	4.0
4	秦运杰	河南农业大学牧医工程学院	6	13	2.0	3.0
5	杨青原	河南农业大学牧医工程学院	3	7	1.0	2.0
6	张军杰	河南农业大学牧医工程学院	3	7	1.0	2.0