鸡干扰素调节因子7的原核表达及多克隆抗体的制备

• 作者: 崔鹏飞 廖明 焦培荣 邓国华 韦良孟
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 生物学
• 关键词: 鸡干扰素调节因子7 原核表达 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2013,（4）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 1-4
• 页数: 4页
• 分类号: Q785
• 字数: 2729字
• 语种: 中文

摘要

为表达鸡干扰素调节因子7蛋白并制备其多克隆抗体,通过RT-PCR技术扩增chIRF7基因的编码序列,构建重组质粒PET30a-chIRF7.将重组质粒转化至大肠埃希菌(E.coil) BL21 (DE3)后经IPTG诱导,SDS-PAGE结果显示,重组蛋白rchIRF7分子量约为60 ku.将纯化的重组蛋白免疫接种小鼠制备多克隆抗体,间接ELISA测定血清抗体滴度在1∶51 200以上,IFA检测结果显示制备的鼠抗chIRF7蛋白多抗能够与AIV刺激的CEF细胞内的chIRF7蛋白发生特异性反应,表明通过原核表达系统表达的重组蛋白rchIRF7具有很好的免疫原性,以其制备的鼠抗chIRF7蛋白多克隆抗体滴度高、特异性好.