毛冠鹿AIF-1原核载体的构建及表达

• 作者: 周楠楠 宋菲 曹祥荣 杨振 白敏 罗丽芸
• 来源期刊: 南京师大学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 毛冠鹿 AIF-1 原核表达
• 年，卷（期）: 2014,（2）
• 所属期刊栏目: 生命科学
• 页码范围: 85-90,95
• 页数: 7页
• 分类号: Q28
• 字数: 3782字
• 语种: 中文

摘要

从毛冠鹿睾丸cDNA文库中筛选出毛冠鹿AIF-1基因,对其进行生物信息学分析,设计引物克隆毛冠鹿AIF-1 cDNA,连入pMD19-T载体,测序正确后酶切,与表达载体pET-28a(+)连接,转化E. coli BL21(DE3), IPTG诱导表达,将诱导表达重组蛋白的菌体超声破碎后,进行可溶性分析,并对可溶性蛋白进行纯化, SDS-PAGE电泳,Western Blot分析以及鉴定重组蛋白.结果表明,毛冠鹿AIF-1(TdAIF-1)含有1个438bp的开放阅读框,编码145个氨基酸,经测序和酶切鉴定后,成功构建重组质粒pET-28a(+)-TdAIF-1,表达大小约20 kD的重组蛋白,主要以可溶形式存在,提高洗脱缓冲液中咪唑浓度至50 mmol/L、100 mmol/L能够得到较纯的蛋白.成功构建毛冠鹿AIF-1原核表达体系,获得重组蛋白,为研究AIF-1蛋白的生物学功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曹祥荣		65	388	11.0	17.0
2	罗丽芸	南京师范大学生命科学学院江苏省分子医学生物技术重点实验室	2	1	1.0	1.0
3	白敏	南京师范大学生命科学学院江苏省分子医学生物技术重点实验室	2	1	1.0	1.0
4	周楠楠	南京师范大学生命科学学院江苏省分子医学生物技术重点实验室	2	1	1.0	1.0
5	杨振	南京师范大学生命科学学院江苏省分子医学生物技术重点实验室	3	5	1.0	2.0
6	宋菲	南京师范大学生命科学学院江苏省分子医学生物技术重点实验室	2	1	1.0	1.0