鱼致病性舒伯特气单胞菌双重PCR检测方法的建立

• 作者: 刘春 吴淑勤 曾伟伟 李凯彬 王庆 王芳 石存斌
• 来源期刊: 中国预防兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 舒伯特气单胞菌 gyrB基因 hlyA基因 双重PCR
• 年，卷（期）: 2014,（1）
• 所属期刊栏目: 诊断和检测技术
• 页码范围: 54-57
• 页数: 4页
• 分类号: S852.61
• 字数: 2857字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-0589.2014.01.14

摘要

为快速准确鉴别检测鳢源致病性舒伯特气单胞菌(A.schubertii),本实验根据该菌的促旋酶B亚单位基因(gyrB)、溶血素基因(hlyA)的保守序列设计引物,建立了检测致病性A.schubertii的双重PCR方法.结果显示gyrB和hlyA基因扩增产物分别为601 bp和375bp;其最低检出菌体DNA量为2.3×10-2ng,最低检出菌数为3×102 cfu.特异性试验结果显示,该方法对温和气单胞菌、嗜水气单胞菌、无乳链球菌、诺卡氏菌、迟缓爱德华氏菌、荧光假单胞菌、柱状黄杆菌、哈氏弧菌以及类志贺邻单胞菌扩增结果均为阴性.应用该方法对37份临床病料样品的检测结果与传统细菌分离鉴定结果的符合率为100％,表明该方法具有良好的特异性和敏感性,可以应用于A.schubertii的快速检测和流行病学研究.