建鲤IL-1β和IL-8基因实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立

• 作者: 倪学勤 曾东 肖拉
• 来源期刊: 湖南农业大学学报（自然科学版）
• 学科: 农学
• 关键词: 建鲤 IL-1β IL-8 实时荧光定量RT-PCR
• 年，卷（期）: 2014,（6）
• 所属期刊栏目: 畜牧·兽医·水产
• 页码范围: 627-632
• 页数: 6页
• 分类号: S941
• 语种: 中文
• DOI: 10.13331/j.cnki.jhau.2014.06.013

摘要

根据GenBank上的基因序列,在保守区设定并合成特异性引物,选择β-actin作为内参基因,采用SYBRGreen Ⅰ染料法,进行熔解曲线分析和标准曲线的制作.熔解曲线表明,β-actin、IL-1β、IL-8的基因产物均为特异性产物,其Tm值分别为86、82.5和84℃;标准曲线表明,各基因Ct值的检测范围为12 ～ 32,扩增效率分别为96.3％,103.2％和102.6％,具有良好的线性关系,且r2均大于0.990;组内变异系数分别为0.14％～0.86％,0.18％ ～0.93％和0.13％ ～ 0.86％;用建立的方法检测健康建鲤头、肾组织中IL-1β、IL-8的表达情况,相对表达量分别为1.09和1.71.综合分析,建立的建鲤IL-1β、IL-8基因实时荧光定量PCR方法具有检测范围广,扩增效率高,特异性强,重复性高的特点,可用于建鲤IL-1β、IL-8基因的表达测定.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	倪学勤		103	967	18.0	27.0
2	曾东		55	321	11.0	16.0
3	肖拉		2	10	1.0	2.0