日本蟳高血糖激素基因的克隆与表达分析

• 作者: 崔晓雨 朱冬发 汤洁 谢熙 邱锡尔
• 来源期刊: 生物学杂志
• 学科: 农学
• 关键词: 日本蟳 高血糖激素 cDNA克隆 组织表达 原核表达
• 年，卷（期）: 2014,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 10-14
• 页数: 5页
• 分类号: S917.4
• 字数: 4146字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-1736.2014.04.010

摘要

通过RACE技术克隆获得日本蟳Charybdis japonica 高血糖激素基因（ CjCHH）全长cDNA序列；运用实时荧光定量PCR（ qRT-PCR）方法分析该基因的组织差异性表达；利用原核表达技术获得CjCHH重组蛋白。序列分析表明：CjCHH cDNA全长1754 bp，包含111bp的5’末端非编码区（UTR），423 bp的开放阅读框（ORF），以及1236 bp的3’UTR，该基因可编码140个氨基酸。序列比对结果显示：CjCHH的成熟肽序列与其它甲壳动物CHH的一致性为41％～88％。系统进化树显示：CjCHH与其它梭子蟹科的CHH聚在一起，这与日本蟳所处的分类地位一致。组织差异性表达研究显示：CjCHH在检测的10个组织中均有表达，其中眼柄中表达量最高，肠和Y-器次之，其余组织表达量较低。成功构建了CjCHH重组表达质粒pET-CHH，并在大肠杆菌（ Escherichia coli）中获得了高效表达，重组蛋白的相对分子量约11 kDa，与预测的相对分子质量大小相一致，表达水平在5 h的IPTG诱导过程中呈现上升趋势。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱冬发	宁波大学海洋学院	39	525	15.0	22.0
2	谢熙	宁波大学海洋学院	13	100	5.0	10.0
3	邱锡尔	宁波大学海洋学院	11	77	5.0	8.0
4	汤洁	宁波大学海洋学院	5	61	5.0	5.0
5	崔晓雨	宁波大学海洋学院	5	61	5.0	5.0