金黄色葡萄球菌α-溶血素的表达、纯化及中和性抗体的制备

• 作者: 刘玉 李迪 杨光 董洁 靳鹏 高亚萍
• 来源期刊: 军事医学
• 学科: 医学
• 关键词: 葡萄球菌,金黄色 α-溶血素 溶血活性 抗体 红细胞
• 年，卷（期）: 2014,（11）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 871-874,884
• 页数: 5页
• 分类号: R378.1
• 字数: 4228字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7644/j.issn.1674-9960.2014.11.008

摘要

目的：利用大肠杆菌重组表达金黄色葡萄球菌（SAU）重要的外分泌毒力因子α-溶血素（alpha hemolysin， Hla），检测Hla蛋白对不同种属红细胞的裂解作用；制备其特异性抗体，并检测抗体的中和活性。方法以SAU NCTC-8325菌株基因组为模板，PCR扩增hla基因，构建重组表达载体pET-28a-Hla，转化大肠杆菌BL21（DE3），利用IPTG诱导表达，通过Ni2＋柱亲和纯化获得Hla蛋白；通过红细胞裂解实验测定Hla蛋白的溶血活性。结果重组Hla蛋白以可溶形式表达，细胞裂解实验表明，纯化的Hla蛋白可以显著裂解兔红细胞，但人红细胞和羊红细胞对Hla杀伤作用不敏感。 ELISA结果表明，获得了效价较高的多克隆抗体。该抗体可以有效抑制Hla对兔红细胞的裂解作用。结论 SAU的Hla蛋白对不同种属红细胞的溶解能力不同，为探讨Hla裂解细胞的机制给予一定的提示；同时所制备的特异性抗体（ anti-Hla）可以抑制Hla的溶血作用，为深入研究Hla的致病机制奠定了基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨光	广西医科大学基础医学院	44	152	7.0	9.0
3	刘玉	军事医学科学院基础医学研究所	14	26	3.0	4.0
4	高亚萍	军事医学科学院基础医学研究所	26	80	5.0	7.0
5	董洁	军事医学科学院基础医学研究所	18	43	4.0	5.0
6	靳鹏	军事医学科学院基础医学研究所	15	118	6.0	10.0
9	李迪	广西医科大学基础医学院	4	23	3.0	4.0