聚苹果酸聚合途径中苹果酰辅酶A连接酶基因的克隆、表达及酶学性质

• 作者: 吴小燕 周峰 涂光伟 邹祥
• 来源期刊: 微生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 出芽短梗霉 苹果酰辅酶A连接酶基因 聚合途径 单体选择性
• 年，卷（期）: 2014,（8）
• 所属期刊栏目: 酶和蛋白质
• 页码范围: 919-925
• 分类号: Q936
• 语种: 中文
• DOI: 10.13343/j.cnki.wsxb.2014.08.010

摘要

[目的]研究出芽短梗霉聚苹果酸聚合途径中苹果酰辅酶A连接酶基因及其酶学特性.[方法]通过设计兼并引物,采用IPCR技术从出芽短梗霉CCTCC M2012223的基因组中扩增得到苹果酰辅酶A连接酶基因的cDNA全长序列,构建表达载体,通过大肠杆菌异源表达,Ni-NTA柱层析纯化酶蛋白,分析其酶学特性.[结果]获得苹果酰辅酶A连接酶基因序列全长为1498 bp,编码440 aa,含有4个外显子和3个内含子.该重组酶最适反应温度为25℃,最适反应pH值为8.0,高浓度底物ATP明显对酶活性具有抑制作用,单体选择性表明对底物草酸、草酰乙酸、丁酸、丙二酸也具有很好催化活性.[结论]成功从出芽短梗霉CCTCC M2012223中克隆获得聚苹果酸聚合途径的苹果酰辅酶A连接酶基因,为聚苹果酸聚合途径解析及新型可降解材料创制奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邹祥	西南大学药学院	23	131	8.0	10.0
3	吴小燕	西南大学药学院	3	7	2.0	2.0
5	涂光伟	西南大学药学院	3	11	2.0	3.0
7	周峰	西南大学药学院	3	5	1.0	2.0