大肠杆菌K12苹果酸酶的克隆、表达与纯化

• 作者: 王金霞 谭海东 赵宗保
• 来源期刊: 生物加工过程
• 学科: 生物学
• 关键词: 苹果酸酶 表达 蛋白质纯化 辅酶
• 年，卷（期）: 2006,（1）
• 所属期刊栏目: 研究与开发
• 页码范围: 35-38,49
• 页数: 5页
• 分类号: Q786
• 字数: 3990字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-3678.2006.01.008

摘要

以大肠杆菌K12基因组DNA为模板,PCR扩增得到NAD+依赖型苹果酸酶(NAD-ME)的全长基因,并克隆到载体pET24b(+)中,得到表达质粒pET24b-ME.在IPTG诱导下,携带pET24b-ME的大肠杆菌BL21(DE3)高效表达分子量约为65 kDa的可溶性蛋白.重组NAD-ME经镍亲和层析纯化,比活达到100U/mg以上.以上结果为深入研究苹果酸酶生物催化特性及其与辅酶的相互作用奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵宗保	中科院大连化学物理研究所生物技术部	4	112	3.0	4.0
2	王金霞	中科院大连化学物理研究所生物技术部	1	5	1.0	1.0
3	谭海东	中科院大连化学物理研究所生物技术部	1	5	1.0	1.0