鹿布鲁氏菌实时荧光定量PCR检测方法的建立

• 作者: 刘红娜 张云 张秀丽 时坤 李建明 杜锐 杨宇航 王文玉 郝俊伟
• 来源期刊: 中国动物检疫
• 学科: 农学
• 关键词: 鹿 布鲁氏菌 实时荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2014,（2）
• 所属期刊栏目: 试 验 研 究
• 页码范围: 71-76
• 页数: 6页
• 分类号: S852.614|S858.25
• 字数: 4051字
• 语种: 中文

摘要

本研究依据布鲁氏菌的特异性基因Omp25c的部分片段作为靶基因，设计探针引物，且优化了反应体系，筛选出引物、探针的最优浓度配比。将扩增产物连接到PGEM-T载体上，制备标准品及标准曲线，建立鹿布鲁氏菌荧光定量PCR检测方法，并对其特异性、稳定性、敏感性进行评价。由标准曲线可知该方法的最低检测浓度可达到36拷贝/μL，比常规PCR灵敏度高出很多。