猪细小病毒1型VP2蛋白的表达与单克隆抗体的制备及应用

• 作者: 刘丹 危艳武 吴洪丽 孙建慧 张智慧 张辉 王一平 陈冬杰 黄立平
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 猪细小病毒1型 VP2蛋白 单克隆抗体
• 年，卷（期）: 2014,（12）
• 页码范围: 1279-1285
• 页数: 7页
• 分类号: S852.659.2
• 语种: 中文

摘要

为研制抗猪细小病毒1型(PPV1) VP2蛋白的单克隆抗体,用重组杆状病毒表达的PPV1 VP2蛋白免疫BALB/c小鼠,融合后采用免疫过氧化物酶单层细胞染色试验筛选抗PPV1 VP2的单克隆抗体阳性细胞株,并对单克隆抗体的腹水效价、免疫反应特性及亚类进行了系统鉴定.结果显示,共获得8株阳性杂交瘤细胞株,其腹水抗体效价均达1∶51 200,其中7株的重链亚类为IgG1,另1株(4A1)为IgM;6株的轻链为c型,另2株(8D7和4A1)为λ型.这些单克隆抗体均可与PPV1感染的猪睾丸细胞呈阳性反应;Western-blot结果显示,这些单克隆抗体可与自然PPV1 VP2蛋白产生良好的免疫反应.以其中1株单克隆抗体(8E4)建立了间接ELISA,通过对重组杆状病毒表达的PPV1 VP2蛋白产物进行的动力学检测表明,第72小时蛋白表达量最高;对PPV1感染细胞增殖规律的测定结果显示,接种后第16小时可检测到病毒感染的阳性细胞,说明该病毒复制周期小于24h.本研究获得的单克隆抗体可用于重组VP2蛋白抗原的检测及病毒繁殖规律的研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张辉	中国农业科学院哈尔滨兽医研究所	41	354	9.0	18.0
2	刘丹	中国农业科学院哈尔滨兽医研究所	33	339	11.0	18.0
3	危艳武	中国农业科学院哈尔滨兽医研究所	16	81	3.0	9.0
4	张智慧	中国农业科学院哈尔滨兽医研究所	3	9	2.0	3.0
5	陈冬杰	中国农业科学院哈尔滨兽医研究所	3	0	0.0	0.0
6	黄立平	中国农业科学院哈尔滨兽医研究所	5	0	0.0	0.0
7	吴洪丽	中国农业科学院哈尔滨兽医研究所	6	0	0.0	0.0
8	王一平	中国农业科学院哈尔滨兽医研究所	4	0	0.0	0.0
9	孙建慧	中国农业科学院哈尔滨兽医研究所	2	0	0.0	0.0