黄颡鱼肝脏胞质中NADP依赖性的异柠檬酸脱氢酶(IDPc)的分离纯化和酶学性质

• 作者: 卓梅琴 朱庆玲 胡伟 谭肖英 黄超
• 来源期刊: 水产学报
• 学科: 农学
• 关键词: 黄颡鱼 异柠檬酸脱氢酶(IDPc) 分离纯化 酶动力学
• 年，卷（期）: 2014,（10）
• 页码范围: 1705-1713
• 分类号: S965.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1231.2014.49156

摘要

采用Sephadex G-100凝胶过滤、DEAE Sepharose离子交换、Sephadex G-25凝胶过滤等方法对黄颡鱼肝脏胞质中NADP依赖性的异柠檬酸脱氢酶(IDPc)进行纯化,并研究其相关的酶学性质.结果显示,IDPc的比活力为7.94 U/mg,亚基分子量为36.7 ku.IDPc活性最大时的pH和温度分别为8.0和65℃,活化能为81.33 kJ/mol,底物米氏常数KmNADP和KmIC分别为0.056和0.175 mmol/L,底物最大反应速率VmNADP和VmIC分别为9.04和10.51 U/mg,催化效率KcatNADP和KcatIC分别为0.16和0.06 min/mg,产物NADPH对IDPc表现为竞争性抑制,抑制常数KiNADPH为0.034 mmol/L.IDPc的催化作用强烈依赖于金属离子Mn2+、Mg2+,没有金属离子存在时反应几乎不进行,二价金属离子激活IDPc的顺序为Mn2+＞ Mg2+＞ Zn2+＞ Ca2+＞ Cu2+,Cu2+几乎不能激活IDPc的活性.Ca2+和Zn2+既是激活剂也是抑制剂,与其作用浓度有关,Cu2+基本上对其无影响.通过对IDPc系统的酶学性质探讨,能够为深入研究IDPc催化与调节机制奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	胡伟	华中农业大学水产学院湖北省淡水养殖协同创新中心	13	41	2.0	6.0
2	谭肖英	华中农业大学水产学院湖北省淡水养殖协同创新中心	10	186	6.0	10.0
3	黄超	华中农业大学水产学院湖北省淡水养殖协同创新中心	6	52	5.0	6.0
4	卓梅琴	华中农业大学水产学院湖北省淡水养殖协同创新中心	3	3	1.0	1.0
5	朱庆玲	华中农业大学水产学院湖北省淡水养殖协同创新中心	1	1	1.0	1.0