环介导恒温扩增技术可视化检测携带tdh基因的致病性副溶血性弧菌

• 作者: Vivian Chi-Hua Wu 姜文洁 孙晓红 潘迎捷 赵勇 陈梅萍
• 来源期刊: 食品工业科技
• 学科: 工学
• 关键词: 副溶血性弧菌 环介导恒温扩增 SYBR Green Ⅰ 耐热溶血毒素(TDH) 快速检测
• 年，卷（期）: 2014,（24）
• 所属期刊栏目: 分析检测
• 页码范围: 71-75
• 分类号: TS201.3
• 语种: 中文
• DOI: 10.13386/j.issn1002-0306.2014.24.006

摘要

建立了环介导恒温扩增技术检测携带tdh基因的致病性副溶血性弧菌.基于副溶血性弧菌高度保守的tdh基因序列,设计了6条特异性引物,两条外引物F3、B3,两条内引物FIP、BIP及两条环引物LF、LB.在Bst DNA Polymerase作用下,60℃恒温水浴进行扩增.对10种细菌共21株菌进行LAMP扩增,所试6株副溶血性弧菌均为阳性,说明引物具有高度特异性.本LAMP方法对纯培养物的灵敏度可达到9.42cfu/mL.对污染食品中副溶血性弧菌的灵敏度为25.3cfu/25g,40～60min内即可完成检测.本方法操作简便、特异性强、灵敏度高,可以为临床提供简单、快速、高灵敏度和高特异性的检测应用.