葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症基因诊断方法的建立

• 作者: 吴彤华 尹彪 张晓庆 曾勇 朱元昌 林奇 蔡靖 陈春媚
• 来源期刊: 临床检验杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶 基因突变 单管多重聚合酶链反应 多重SNaPshot技术 基因诊断
• 年，卷（期）: 2014,（3）
• 所属期刊栏目: 临床检验技术研究
• 页码范围: 188-192
• 页数: 5页
• 分类号: R394.3
• 字数: 3530字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13602/j.cnki.jcls.2014.03.08

摘要

目的 建立有效可行的高通量葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(glucose-6-phosphate dehydrogenase,G6PD)基因诊断新技术.方法 建立单管三重PCR扩增G6PD基因外显子2～13目的片段,构建双管25重SNaPshot反应体系检测25个已报道的中国人群的G6PD基因突变位点.用20份已知基因型的样品进行重复性试验.对60例未知样品同时用多重SNaPshot基因分型技术和DNA测序法进行双盲试验.结果 建立的多重SNaPshot技术可同时检测25个G6PD基因突变位点,且可区分正常、女性杂合子与男性半合子/女性纯合子,有效检出复合突变.批内及批间的重复性均达到100％.60例未知样本检出23例突变,SNaPshot基因分型结果与测序结果完全一致,特异性和准确性均为100％.结论 建立的单管三重PCR结合双管25重SNaPshot技术是一种有效可行的G6PD缺乏症基因诊断的新方法.