EMMPRIN糖基化突变质粒的构建及功能检测

• 作者: 宋润敏 李江 杨柳 王娜 秦晖 赵超悦
• 来源期刊: 吉林大学学报（医学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 细胞外基质金属蛋白酶诱导因子 点突变 糖基化 细胞增殖
• 年，卷（期）: 2014,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 583-587
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 字数: 3565字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13481/j.1671-587x.20140324

摘要

目的：构建细胞外基质金属蛋白酶诱导因子（EMMPRIN）糖基化位点突变质粒，探讨其与肿瘤细胞增殖的关系。方法：利用PCR定点诱变技术构建 EMMPRIN糖基化位点突变质粒。突变成功后，对突变质粒进行功能检测，Western blotting 法检测 EMMPRIN蛋白表达；免疫荧光法检测细胞形态学变化；MTT法检测突变质粒与肿瘤细胞增殖的关系。结果：酶切鉴定和测序证实，将 EMMPRIN序列中第44、152和186位的天冬酰胺突变成谷氨酰胺，成功构建 EMMPRIN／GFP（N44Q）、EMMPRIN／GFP（N152Q）和 EMMPRIN／GFP（N186Q）糖基化单点突变质粒；糖基化位点突变后，突变型细胞核分裂相显著减少，伪足数减少；MTT法检测，与对照组比较，野生型组细胞存活率明显升高（P＜0.05）；而 EMMPRIN 糖基化位点突变后，与野生型比较， EMMPRIN（N44Q）、EMMPRIN （N152Q）和 EMMPRIN （N186Q）细胞存活率均明显降低（P ＜0.05）。结论：EMMPRIN突变型能抑制肿瘤细胞的增殖，且随作用时间增加，抑制作用减弱；EMMPRIN糖基化修饰与肿瘤细胞的增殖有关联。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李江	吉林大学口腔医院口腔修复科	84	717	14.0	21.0
2	杨柳	吉林大学口腔医院口腔修复科	54	72	4.0	6.0
3	赵超悦	吉林大学口腔医院口腔修复科	5	15	1.0	3.0
4	宋润敏	东北师范大学生命科学学院膜通道实验室	2	3	1.0	1.0
5	王娜	东北师范大学生命科学学院膜通道实验室	28	83	5.0	7.0
6	秦晖	东北师范大学生命科学学院膜通道实验室	1	1	1.0	1.0