用高保真DNA聚合酶介导的PCR检测β地中海贫血热点突变

• 作者: 兰芬 周翠兰 廖端芳 李凯 郭紫芬
• 来源期刊: 临床检验杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 高保真聚合酶 硫化修饰 β地中海贫血 PCR
• 年，卷（期）: 2014,（4）
• 所属期刊栏目: 临床检验技术研究
• 页码范围: 245-248
• 页数: 4页
• 分类号: Q341
• 字数: 3652字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13602/j.cnki.jcls.2014.04.02

摘要

目的 用高保真DNA聚合酶介导的PCR检测β地中海贫血基因热点突变.方法 选取已知中国人群β珠蛋白基因CD41-42、IVS-2nt654、TATAbox-28、CD17、CD71-72及CD26热点突变位点为检测靶点,分别设计3'末端与野生型基因位点或突变型基因位点完全配对的引物,并用硫化磷酸修饰,进行高保真DNA聚合酶介导的引物延伸反应.用多重PCR反应体系检测临床已知分别含CD26和TATAbox-28突变热点患者的DNA标本.结果 对野生模板而言,仅有野生型等位基因相关引物有产物产生,而突变型等位基因位点特异性引物无产物产生.反之,使用突变模板,仅突变型等位基因位点相关引物有产物产生,而野生型等位基因位点特异性引物无产物产生.高保真DNA聚合酶介导的多重引物延伸反应筛查含有CD26或TATAbox-28突变的患者DNA标本时显示,突变引物混合物只有相应突变位点的产物产生,而野生引物混合物则有除突变位点以外的其他5个位点的产物产生.结论 建立了基于高保真DNA聚合酶的筛查β地中海贫血基因热点突变的PCR技术.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	廖端芳	南华大学药物药理研究所	190	1734	19.0	31.0
3	李凯	南华大学药物药理研究所	17	128	7.0	11.0
9	周翠兰	南华大学药物药理研究所	13	48	4.0	6.0
10	郭紫芬	南华大学药物药理研究所	32	133	7.0	9.0
11	兰芬	南华大学药物药理研究所	2	10	1.0	2.0