基因突变敏感性分子开关检测β地中海贫血基因突变

• 作者: 兰芬 廖端芳 李凯 邓坤龙 郭紫芬
• 来源期刊: 实用医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: β地中海贫血 高保真聚合酶 硫化修饰引物
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 178-180
• 分类号: R1
• 字数: 2861字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-5725.2012.2.006

摘要

目的:采用高保真DNA聚合酶介导的基因突变敏感性分子开关准确、快速检测β地中海贫血.方法:首先提取正常人血液基因组DNA,根据已知β珠蛋白基因热点突变CD41-42、IVS2-654区域序列,分别设计突变序列扩增引物,利用低保真酶进行引物延伸反应,将其PCR产物克隆到pMD19-T载体,得到β地中海贫血常见的两个突变住点的基因突变克隆:CD41-42、IVS2-654,然后以这两个突变位点为检测靶点,分别设计3'末端与野生型基因住点或突变基因位点配对的引物,硫化磷酸修饰3'末端并偶联高保真DNA聚合酶构成的基因突变敏感性分子开关,对含有相应突变的阳性质粒模板及正常人基因组DNA模板进行引物延伸反应,并通过凝胶成像系统对其进行分析.结果:当引物与模板完全配对时,引物被延伸,有PCR产物:当引物与模板不完全配对时,引物不被延伸,无PCR产物.结论:高保真DNA聚合酶介导的基因突变敏感性分子开关能准确、快速筛查β地中海贫血CD41-42、IVS2-654突变,提示其在单基因遗传病的诊断中具有广阔的应用前景.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李凯	苏州大学第二附属医院分子医学中心	20	40	4.0	6.0
2	廖端芳	湖南中医药大学药学院中医诊断学系	71	171	7.0	10.0
3	郭紫芬	南华大学药物药理研究所	32	133	7.0	9.0
4	兰芬	南华大学药物药理研究所	2	10	1.0	2.0
5	邓坤龙	南华大学药物药理研究所	1	9	1.0	1.0