GFP-BMSC-TRAIL载体的构建及其生物学活性的检测

• 作者: 张力 曹刚 汤祥军 涂汉军 罗杰 陈晓 鲁军体 黄宽明
• 来源期刊: 中华神经医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 骨髓间充质干细胞 载体
• 年，卷（期）: 2014,（11）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1088-1091
• 页数: 4页
• 分类号: R394.2
• 字数: 2835字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1671-8925.2014.11.002

摘要

目的 探讨转染肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)基因的骨髓间充质干细胞(BMSCs)基因表达情况. 方法 实验分3组:实验组转染TRAIL基因至绿色荧光蛋白(GFP)标记的BMSCs,空载体组转染空载体脂质体,对照组即空白对照的BMSCs.采用脂质体法将TRAIL转入GFP-BMSC中,RT-PCR法检测TRAILmRNA水平的表达,Western blotting、免疫荧光检测TRAIL蛋白的表达,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测转染后BMSCs的增殖活性. 结果 免疫荧光显示,转染TRAIL后24 h和48 h在胞浆和胞膜可见到TRAIL蛋白的表达,24 h比48 h荧光明显增强,对照组及空载体组未见表达;RT-PCR、Westem blotting显示实验组TRIAL高表达,对照组及空载体组未见高表达;MTT法证实转染后BMSCs细胞的增殖活性无明显影响. 结论 构建的BMSC-TRAIL载体能够稳定表达目的基因,BMSCs可做为生物载体.