烟草靶斑病菌内切多聚半乳糖醛酸酶基因endoPGs的克隆及表达特征分析

• 作者: 伏颖 吴元华 安梦楠 赵秀香 赵艳琴 陈建光
• 来源期刊: 中国农业科学
• 关键词: 烟草靶斑病菌 内切多聚半乳糖醛酸酶基因 克隆 基因表达
• 年，卷（期）: 2014,（10）
• 所属期刊栏目: 植物保护
• 页码范围: 1939-1946
• 页数: 8页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2014.10.007

摘要

【目的】内切多聚半乳糖醛酸酶（endo polygalacturonases，endoPGs）是重要的致病因子之一。论文从烟草靶斑病菌（Rhizoctonia solani）强致病力菌株YC-9和弱致病菌株LF-2中克隆该致病基因，分析比较该基因的序列特征、进化关系和表达特性，研究其在与烟草互作过程的致病作用。【方法】通过比较GenBank中不同植物病原真菌的endoPGs序列设计简并引物，首先获得菌株YC-9及LF-2的endoPGs基因片段，再采用RACE技术克隆获得其cDNA全长序列；生物信息学分析比较其保守结构域及序列特征；采用MEGA 4.0软件构建endoPGs的系统进化树；通过real-time RT-PCR技术对强致病力菌株YC-9及弱致病力菌株LF-2的endoPGs与烟草K326互作的表达特性进行研究。【结果】克隆获得了烟草靶斑病菌强致病力菌株YC-9和弱致病力菌株LF-2的endoPGs的cDNA全长序列，分别命名为endoPG1和endoPG2，开放阅读框（ORF）长度均为1086 bp，编码361个氨基酸；比较分析表明endoPG1和endoPG2的推测蛋白均具有PLNO3003基因家族保守结构域，其跨膜结构间存在差异；成功构建了该基因系统进化树，结果表明来自烟草靶斑病菌的endoPGs构成独立分支，且烟草靶斑病菌endoPG1及endoPG2同源关系最近；real-time RT-PCR表达特性分析结果显示，靶斑病菌endoPG1和endoPG2与烟草互作（接种）之后该基因的表达与未互作（不接种）的对照样品相比均呈明显上调趋势，同时 endoPG1表达迅速且高于endoPG2。【结论】烟草靶斑病菌强致病力菌株 YC-9及弱致病力菌株 LF-2的内切多聚半乳糖醛酸酶基因均具有PLNO3003基因家族的保守结构域，其推测蛋白的跨膜结构间存在差异，该推测蛋白与烟草靶斑病菌同源关系最近，且endoPG1和endoPG2的推测蛋白的同源性最高；内切多聚半乳糖醛酸酶基因的表达受与烟草互作的诱导，在不同致病力菌株中存在明显差异。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴元华	沈阳农业大学植物保护学院	159	2074	24.0	38.0
2	赵秀香	沈阳农业大学植物保护学院	85	876	18.0	25.0
3	赵艳琴	沈阳农业大学植物保护学院	19	77	5.0	7.0
7	伏颖	沈阳农业大学植物保护学院	10	52	5.0	6.0
8	安梦楠	沈阳农业大学植物保护学院	17	34	3.0	5.0
9	陈建光	沈阳农业大学植物保护学院	6	29	3.0	5.0