白木香查尔酮合成酶基因(AsCHS1)启动子克隆及激素应答元件功能的初步鉴定

• 作者: 彭世清 戴好富 曹天骏 李辉亮 梅文莉 郭冬
• 来源期刊: 热带作物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 白木香 查尔酮合酶 启动子 染色体步移 瞬时表达 GUS
• 年，卷（期）: 2014,（10）
• 所属期刊栏目: 生物技术与组织培养
• 页码范围: 1950-1956
• 页数: 7页
• 分类号: Q943.2
• 字数: 4072字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2561.2014.10.012

摘要

利用染色体步移法克隆了白木香查尔酮合成酶基因(AsCHS1)ATG上游1 082 bp的启动子序列,该启动子序列中AT含量高达69.03％,符合真核生物启动子的序列特征.通过启动子预测软件分析可知,该序列的转录起始位点位于翻译起始位点-65 bp处,并且其上游-25～30 bp区域存在TATA-box等典型的真核生物启动子核心元件,同时含有一些顺式作用元件如赤霉素应答元件GARE-motif、茉莉酸甲酯应答元件CGTCA-motif、水杨酸应答元件TCA-element等激素调控元件,光应答元件Box Ⅰ、G-Box、ACE,厌氧诱导元件ARE等.通过构建pC-1 082proAsCHS1植物表达载体,借助农杆菌将重组载体转化到烟草叶片中.蛋白定量结果表明,该序列可以驱动GUS的表达,具有启动子活性;脱落酸显著增强该启动子的活性,乙烯则显著抑制该启动子的活性.