HCMV重组嵌合抗原表达质粒构建及免疫反应的初步鉴定

• 作者: 曾宪聪 汪小五 王林定 陈伟
• 来源期刊: 安徽医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 人巨细胞病毒 重组融合抗原 免疫反应性
• 年，卷（期）: 2014,（6）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 752-755,756
• 页数: 5页
• 分类号: R373.4
• 字数: 3237字
• 语种: 中文

摘要

目的：选用人巨细胞病毒( HCMV)抗原性强且亲水性较高片段构建融合抗原表达质粒，诱导其表达，纯化目的蛋白；并初步鉴定其免疫反应性。方法通过Protean软件分析了HCMV UL32、UL44、UL83序列，设计合理引物；各基因片段用Overlap方法连接，并引入BglⅡ、BamHⅠ酶切位点，使之可通过酶切与质粒pQE-80L连接。重组质粒转化入感受态BL21(DE3)菌株，经PCR、酶切鉴定目的基因后再诱导、表达、纯化，获得目的蛋白，采用Western blot法检测免疫反应性。结果诱导后的重组菌pQE80-L-UL32-UL44-UL83经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳( SDS-PAGE )证实蛋白表达在包涵体。纯化后获得大小约为52 ku的目的蛋白，采用Western blot法检测证实重组嵌合抗原能与HC-MV阳性血清有反应。结论构建了重组嵌合抗原表达质粒，并诱导、表达、纯化获得目的蛋白。 Western blot法鉴定嵌合抗原是HCMV特异性抗原且有免疫反应性。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈伟	安徽医科大学微生物学教研室	48	201	9.0	11.0
2	王林定	安徽医科大学微生物学教研室	11	17	3.0	4.0
6	汪小五	安徽医科大学微生物学教研室	7	15	3.0	3.0
7	曾宪聪	安徽医科大学微生物学教研室	4	12	3.0	3.0