新城疫病毒实时荧光RT-LAMP检测方法的建立

• 作者: 刘建利 孙洁 张彩虹 曹琛福 曾少灵 胡运发 阮周曦 陈书琨 陈兵
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 新城疫病毒 实时荧光反转录环介导等温扩增 现场检测
• 年，卷（期）: 2014,（7）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 11-14
• 页数: 4页
• 分类号: S852.659.5|Q789
• 字数: 3195字
• 语种: 中文

摘要

新城疫是影响家禽养殖业的重大动物疫病,建立现场快速分子学检测方法是其防控关键.借助热裂解法抽提病毒RNA,在筛选出最佳核酸染料Calcein的基础上,建立新城疫病毒(NDV)实时荧光反转录环介导等温扩增(rRT-LAMP)检测法,并对该法进行特异性、敏感性及准确性分析.试验结果显示,本试验所建立的NDV-rRT-LAMP方法可有效鉴别NDV,其敏感性可检测至50个基因拷贝,与国家标准实时荧光定量RT-PCR检测法一致;该法特异性强,与AIV、IBV等常见禽呼吸道传染病病原无交叉反应.小规模田间试验显示,该法用于NDV的普查监测,结果可靠.结果表明,建立的NDV-rRT-LAMP检测法可满足NDV现场快速分子检测需求.