解旋酶依赖性等温扩增快速检测O157:H7及其毒力基因的研究

• 作者: 刘爱平 朱韩武 李征莉 谢群 谭徽 郑文 陈柏塘 雷飏
• 来源期刊: 实用预防医学
• 学科: 医学
• 关键词: 解旋酶依赖性等温扩增 大肠杆菌O157∶H7 hlyA基因 eaeA基因 rfb基因
• 年，卷（期）: 2014,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 288-290
• 页数: 3页
• 分类号: R378.2
• 字数: 3203字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-3110.2014.03.010

摘要

目的 建立一种快速、特异的检测大肠杆菌O157∶H7及其毒力基因的解旋酶依赖性等温扩增法(HDA). 方法 以大肠杆菌O157∶H7的溶血素基因(hly)、粘附抹平因子(eae)和O抗原编码基因(rfb)为扩增对象,设计3对特异性HDA引物,通过优化条件后进行灵敏度和特异度试验,并与普通PCR法比较. 结果 HDA法从标准菌株和实验室分离株中均扩增出hlyA、eaeA和rfb基因片段,产物大小分别为100、93和109 bp,而其他非大肠杆菌O157∶H7的扩增结果均为阴性.通过对各梯度大肠杆菌O157∶H7菌悬液的检测表明HDA法可以检测的最低菌液浓度为3.0×101 cfu/ml,该法与普通PCR法灵敏度相当. 结论 本HDA法具有较高的灵敏度和特异度,可快速、高效地检出大肠杆菌O157∶ H7菌和其毒力基因,而且对试验仪器要求低,特别适合应急处置现场和基层检验机构作为临床大肠杆菌O157∶ H7感染的辅助诊断.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	谢群		13	25	3.0	3.0
2	谭徽		19	28	3.0	4.0
3	陈柏塘		9	14	2.0	3.0
4	雷飏		5	7	2.0	2.0
5	李征莉		4	11	3.0	3.0
6	朱韩武		18	34	3.0	4.0
7	郑文		8	15	3.0	3.0
8	刘爱平		3	8	2.0	2.0