单纯疱疹病毒Ⅱ型ICP22真核表达载体的构建及其对Vero细胞活性的影响

• 作者: 张强 王高峰 薄惠 邢建华
• 来源期刊: 现代预防医学
• 学科: 医学
• 关键词: 真核表达载体 感染细胞蛋白22 单纯疱疹病毒Ⅱ型
• 年，卷（期）: 2014,（22）
• 所属期刊栏目: 实验技术及其应用
• 页码范围: 4117-4120
• 分类号: R319
• 语种: 中文

摘要

目的 构建单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-2)感染细胞蛋白22 (ICP22)真核表达载体pEGFP-C2/ICP22并研究其对非洲绿猴肾细胞(Vero)细胞活性的影响.方法 经双酶切实验和测序验证,以Xfect为介导将构建的真核表达载体pEGFP-ICP22转染至Vero细胞,并通过反转录PCR (RT-PCR)和绿色荧光检验其在细胞中的表达,最后以MTT法检测细胞活性.结果 48 h后观察,发现转染重组质粒组细胞经RT-PCR验证有目的基因的转录,并通过荧光显微镜观察到融合蛋白表达.而空白质粒组只检测到荧光蛋白但未检测到目的基因转录本,且对照组未检测到荧光蛋白表达.转染重组质粒的细胞相对活性值为(82.39±6.44)％.结论 成功构建了pEGFP-ICP22真核表达载体,实现了其在Vero中的表达,融合蛋白GFP-ICP22明显降低了细胞活性.为进一步探讨HSV-ⅡICP22的功能和HSV-Ⅱ潜伏复发机制奠定了实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张强	黄河科技学院医学院实验中心	20	34	3.0	4.0
2	邢建华	黄河科技学院医学院实验中心	30	106	6.0	8.0
3	王高峰	黄河科技学院医学院实验中心	20	59	4.0	7.0
4	薄惠	黄河科技学院医学院实验中心	28	30	2.0	3.0