α-烯醇化酶重组质粒的构建及其表达形式的研究

• 作者: 宁兴旺 朱惠斌 王述湘 葛金文 谢小兵
• 来源期刊: 医学信息
• 关键词: 图书馆
• 年，卷（期）: 2014,（20）
• 所属期刊栏目: 临床医学 -- 论著
• 页码范围: 215-216
• 页数: 2页
• 字数: 3147字
• 语种: 中文

摘要

目的构建α-烯醇化酶（alpha enolase，ENO1）重组表达质粒，并研究其表达形式。方法以人脐静脉内皮细胞（Human Umbilical Vein Endothelial Cel s，HUVEC）总RNA为模板合成cDNA；根据ENO1基因序列，设计上下游引物，以cDNA为模板，经多聚酶链式反应（Polymerase Chain Reaction，PCR）扩增得到目的基因片段ENO1；用T4DNA连接酶连接酶切产物和原核表达载体pET28(a)，获得重组表达质粒pET28(a)-ENO1；将pET28(a)-ENO1在BL21(DE3) E.Coli.大肠杆菌中诱导表达，分别取菌液上清和沉淀进行SDS-PAGE电泳，确定重组质粒的表达形式。结果重组表达质粒pET28(a)-ENO1中的ENO1测序结果与GeneBank上的序列一致；pET28(a)-ENO1以可溶性表达为主。结论ENO1重组质粒的成功构建及其可溶性为主的表达形式的确定，为研究ENO1的生物学活性及功能奠定了基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	葛金文	湖南中医药大学中西医结合学院	195	1479	21.0	29.0
2	朱惠斌	湖南中医药大学第一附属医院医学检验中心	33	245	8.0	14.0
3	谢小兵	湖南中医药大学第一附属医院医学检验中心	62	507	11.0	20.0
4	宁兴旺	湖南中医药大学第一附属医院医学检验中心	27	124	6.0	9.0
5	王述湘	湖南中医药大学第一附属医院医学检验中心	9	47	3.0	6.0