猪瘟病毒2．1b基因亚亚型野毒株的体外细胞传代适应与全基因组序列分析?

• 作者: 吕宗吉 张莉 涂长春 王全凯 谢晓明 郭焕成 龚文杰
• 来源期刊: 吉林农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪瘟病毒 2?1b亚亚型 细胞适应性传代 全基因组
• 年，卷（期）: 2015,（5）
• 页码范围: 605-611
• 页数: 7页
• 分类号: S852.651
• 字数: 5178字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13327/j.jjlau.2015.2439

摘要

利用RT－PCR从广东某猪场疑似猪瘟（ Classical swine fever， CSF）病例中检测出CSFV，并对扩增的E2全长基因进行了序列测定和系统进化分析。结果表明：引发该起猪瘟疫情的毒株属于CSFV 2?1b基因亚亚型，命名为GD176。为了进一步了解该毒株的复制特点，利用PK－15细胞对GD176进行了体外细胞适应性传代，并对获得的细胞适应毒GD176?F46进行了全基因组测序。结果表明：GD176通过在PK－15上不断传代，最终获得了高滴度的适应毒株，其滴度从第6代的102?61 TCID50／mL提高至第46代的108?06 TCID50／mL。病毒生长动力学结果显示，GD176?F46在感染后72 h病毒滴度达到最高值（108?17 TCID50／mL）。为进一步分析GD176在细胞传代适应过程中的稳定性，对不同代次细胞毒的E2全长基因进行扩增和序列测定，结果发现：GD176?F0与GD176?F6、F10、F15、F20、F25、F30、F35、F40和F46的E2基因序列完全一致，这表明囊膜蛋白E2在病毒适应PK－15细胞过程中非常稳定。通过比对GD176和其他2?1亚型毒株各蛋白的氨基酸序列发现，不同毒株之间同源性最小的病毒蛋白是NS5A，低于病毒囊膜糖蛋白E2。获得了高度适应PK－15细胞的GD176细胞毒，为进行病毒毒力评价、复制和致病特性研究奠定了基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王全凯	吉林农业大学动物科学技术学院	110	700	15.0	21.0
2	涂长春	军事医学科学院军事兽医研究所	56	449	12.0	18.0
3	张莉	吉林农业大学动物科学技术学院	3	10	2.0	3.0
5	郭焕成	军事医学科学院军事兽医研究所	14	81	4.0	8.0
8	谢晓明	吉林农业大学动物科学技术学院	2	3	1.0	1.0
12	吕宗吉		2	1	1.0	1.0
13	龚文杰	军事医学科学院军事兽医研究所	3	7	2.0	2.0