牙鲆SRF基因的克隆及真核表达载体的构建

• 作者: 付元帅 张红梅 施志仪 苏艳芳 高丽娜
• 来源期刊: 海洋渔业
• 学科: 生物学
• 关键词: SRF 牙鲆 克隆 真核表达
• 年，卷（期）: 2015,（4）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 331-340
• 页数: 10页
• 分类号: Q782
• 字数: 6468字
• 语种: 中文

摘要

采用RACE-PCR技术,从牙鲆(Paralichthys olivaceus)组织中克隆了血清应答因子(SRF)基因全长序列,该序列全长2 477 bp,开放阅读框1 503 bp,编码500个氨基酸.通过氨基酸同源序列比对,牙鲆SRF与其它物种的同源性较高,在氨基酸序列的N端具有NLS结构域和高度保守的MADS结构域.用PCR方法扩增SRF基因的编码区片段,克隆到pEGFP-N1载体中,构建真核表达载体pEGFP-N1-SRF,将重组质粒转染牙鲆胚胎细胞,在荧光显微镜下观察转染细胞有绿色荧光蛋白表达.荧光定量PCR和Western blot实验进一步证实,SRF在转染细胞中高表达.说明真核表达载体pEGFP-N1-SRF构建成功,为进一步研究SRF在牙鲆变态发育中的作用奠定了实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	付元帅	上海海洋大学农业部淡水水产种质资源重点实验室	17	50	3.0	6.0
2	施志仪	上海海洋大学农业部淡水水产种质资源重点实验室	48	217	9.0	11.0
3	苏艳芳	上海海洋大学农业部淡水水产种质资源重点实验室	2	9	1.0	2.0
4	张红梅	上海海洋大学农业部淡水水产种质资源重点实验室	2	9	1.0	2.0
5	高丽娜	上海海洋大学农业部淡水水产种质资源重点实验室	2	9	1.0	2.0