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中华内分泌外科杂志期刊
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CCDC67基因慢病毒表达载体的构建及鉴定
CCDC67基因慢病毒表达载体的构建及鉴定
作者:
张艳
李红强
殷德涛
江金花
王勇飞
王庆端
许建辉
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
CCDC67
293T细胞
慢病毒载体
摘要:
目的 构建CCDC67基因慢病毒表达载体,为后续转染目的细胞奠定基础,并实现在细胞中高效、稳定表达.方法 从含有CCDC67基因的cDNA文库中,利用PCR方法钓取CCDC67基因编码区片段.将目的基因与酶切载体pGV-208进行定向连接,其产物转化细菌感受态细胞.对长出的克隆先进行菌落PCR鉴定,再对PCR鉴定阳性的克隆进行测序和比对分析,对比正确的克隆即为构建成功的目的质粒.将构建成功的目的质粒和两种辅助包装质粒共转染293T细胞,包装成慢病毒,在荧光显微镜下观察慢病毒转染293T细胞后荧光表达情况.采用Western blot检测CCDC67及绿色荧光蛋白融合蛋白表达情况.结果 PCR产物经电泳分析表明成功获取CCDC67基因cDNA克隆,测序结果显示慢病毒转染质粒连接构建正确.荧光表达检测显示293T细胞中产生慢病毒颗粒,Western blot显示CCDC67在细胞内稳定表达.结论 成功构建CCDC67基因慢病毒表达载体,为后续转染目的细胞后从分子水平探讨CCDC67基因功能奠定了实验基础.
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文献信息
篇名
CCDC67基因慢病毒表达载体的构建及鉴定
来源期刊
中华内分泌外科杂志
学科
关键词
CCDC67
293T细胞
慢病毒载体
年,卷(期)
2015,(1)
所属期刊栏目
论著
研究方向
页码范围
30-33
页数
4页
分类号
字数
3103字
语种
中文
DOI
10.3760/cma.j.issn.1674-6090.2015.01.010
五维指标
作者信息
序号
姓名
单位
发文数
被引次数
H指数
G指数
1
殷德涛
郑州大学第一附属医院甲状腺外科
76
429
12.0
16.0
2
江金花
23
200
8.0
14.0
3
王庆端
29
285
9.0
16.0
4
张艳
15
42
3.0
5.0
5
李红强
郑州大学第一附属医院甲状腺外科
14
125
5.0
11.0
6
王勇飞
郑州大学第一附属医院甲状腺外科
8
63
5.0
7.0
7
许建辉
郑州大学第一附属医院甲状腺外科
5
22
2.0
4.0
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引文网络
引文网络
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二级引证文献(0)
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二级引证文献(3)
2019(3)
引证文献(0)
二级引证文献(3)
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节点文献
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293T细胞
慢病毒载体
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
中华内分泌外科杂志
主办单位:
中华医学会
出版周期:
双月刊
ISSN:
1674-6090
CN:
11-5807/R
开本:
大16开
出版地:
重庆市渝中区袁家岗友谊路1号重庆医科大学附属第一医院
邮发代号:
创刊时间:
2007
语种:
chi
出版文献量(篇)
2271
总下载数(次)
19
总被引数(次)
6033
相关基金
国家自然科学基金
英文译名:
the National Natural Science Foundation of China
官方网址:
http://www.nsfc.gov.cn/
项目类型:
青年科学基金项目(面上项目)
学科类型:
数理科学
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