人LC3B基因的真核表达及鉴定

• 作者: 叶棋浓 徐小洁 梁迎春 王涛 纪贝贝 胡毅 范忠义 董倩
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 人LC3B 克隆 真核表达
• 年，卷（期）: 2015,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 652-654
• 页数: 3页
• 分类号: Q78
• 字数: 2804字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2015.05.014

摘要

目的:构建带HA标签的重组人LC3B基因的真核表达载体,获得HA-LC3B融合蛋白,并初步检测其生物学功能.方法:从人乳腺文库中通过PCR技术扩增LC3B基因编码序列,将其插入pcDNA3.0-HA载体,获得HA-LC3B真核表达载体;将重组质粒与空载体分别转染人胚肾293T细胞,通过Western印迹检测转染细胞的表达情况,免疫共沉淀实验证实其生物学活性.结果:双酶切和测序结果表明HA-LC3B真核表达质粒构建成功,Western印迹表明重组质粒转染293T细胞后获得表达;免疫共沉淀实验显示HA-LC3B融合蛋白可以和Atg4B蛋白相互作用,具有较好的生物学活性.结论:在真核表达系统中表达了带HA标签的人LC3B,为进一步研究细胞自噬奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	叶棋浓	军事医学科学院生物工程研究所	138	519	11.0	17.0
2	王涛	军事医学科学院生物工程研究所	93	628	13.0	22.0
3	徐小洁	军事医学科学院生物工程研究所	51	112	6.0	7.0
4	董倩	解放军总医院肿瘤内一科	3	2	1.0	1.0
5	纪贝贝	解放军总医院肿瘤内一科	2	3	1.0	1.0
6	范忠义	解放军总医院肿瘤内一科	10	38	4.0	6.0
7	梁迎春	军事医学科学院生物工程研究所	10	36	2.0	6.0
8	胡毅	解放军总医院肿瘤内一科	59	296	8.0	14.0