马链球菌兽疫亚种纤连蛋白结合蛋白的原核表达及其免疫原性的检测

• 作者: 周梦曦 范皓天 范红结 蒋子奇 蔺辉星
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 马链球菌兽疫亚种 纤连蛋白结合蛋白 原核表达 免疫保护
• 年，卷（期）: 2015,（2）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 167-171
• 页数: 5页
• 分类号: S852.611
• 语种: 中文

摘要

根据已发表的纤连蛋白结合蛋白(fibronectin-binding protein,FNZ)基因(fnz)序列,设计并合成1对引物,以马链球菌兽疫亚种(SEZ) ATCC35246菌株基因组DNA为模板,PCR扩增fnz基因,并定向将其克隆至表达载体pET-32a(+)中.重组质粒pET-32a(+)-fnz经酶切及测序鉴定后,在大肠杆菌BL21中进行诱导表达,表达产物经Western-blot检测后进行纯化,得到了74 ku的纯化蛋白.以纯化的FNZ与ISA206佐剂以1∶1的体积比混合后免疫ICR小鼠,每只小鼠背部皮下多点注射120 μL(含蛋白22.5 μg),14d后以同样方法进行加强免疫.间接ELISA检测结果表明,FNZ免疫组小鼠的血清FNZ抗体效价显著高于其他3个对照组.二免后第15天小鼠腹腔注射ATCC35246菌液5.0×105 CFU(10 LD50),观察注射后10d内小鼠的临床表现及存活状况;结果显示,FNZ免疫组小鼠的存活率为62.5％,显著高于阴性对照组(0)和空白对照组(0),但低于SEZ灭活疫苗免疫组(87.5％).结果表明,FNZ可使免疫小鼠对SEZ的感染产生一定的抵抗作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	范红结		92	629	14.0	20.0
2	蔺辉星		9	5	1.0	2.0
3	范皓天		1	0	0.0	0.0
4	周梦曦		1	0	0.0	0.0
5	蒋子奇		1	0	0.0	0.0