bcr启动子驱动增强绿色荧光蛋白表达转基因小鼠的制备和初步鉴定

• 作者: 刘民 刘雷 劳荃蘅 季明春 王宝珠 薛整风
• 来源期刊: 实验动物与比较医学
• 学科: 生物学
• 关键词: 慢性髓性白血病(CML) bcr启动子 增强绿色荧光蛋白(EGFP) 转基因小鼠
• 年，卷（期）: 2015,（2）
• 所属期刊栏目: 综述
• 页码范围: 149-154
• 页数: 6页
• 分类号: Q95-33
• 字数: 3967字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2015.02.013

摘要

目的 制备bcr启动子驱动-增强绿色荧光蛋白(bcr-EGFP)转基因小鼠模型,在活体水平验证bcr启动子的启动特异性.方法 以慢性髓性细胞白血病(CML)细胞株K562细胞基因组为模板,PCR扩增1.1 kb bcr启动子,在扩增产物的上、下游引物加入了Ase Ⅰ、EcoR Ⅰ酶切位点,AseⅠ、EcoRⅠ双酶切pEGFP-N1真核表达质粒载体,去除载体自身的CMV启动子,并将1.1 kbbcr启动子定向克隆到EGFP绿色荧光蛋白报告基因上游,构建pbcr-EGFP真核表达载体,并将此重组质粒瞬时转染K562细胞和NIH3T3细胞,进行表达验证.显微注射法制备bcr-EGFP转基因小鼠,采用PCR方法进行初步整合检测.结果 显微注射583枚受精卵,移植到30只受体鼠输卵管中,受体鼠妊娠26只,共生产首建鼠90只,经过PCR检测,4#(♀)、36#(♂)和81#(♂)等3只F0代为转基因整合阳性鼠.结论 成功制备了bcr-EGFP转基因小鼠,为进一步研究bcr启动子在CML转基因小鼠模型制备的安全性和可靠性提供线索和帮助.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	薛整风	扬州大学比较医学中心	51	387	12.0	17.0
2	季明春	扬州大学医学院	80	256	7.0	12.0
3	刘雷	蚌埠医学院实验动物中心	5	2	1.0	1.0
4	王宝珠	扬州大学比较医学中心	2	13	1.0	2.0
5	劳荃蘅	蚌埠医学院实验动物中心	8	2	1.0	1.0
6	刘民	蚌埠医学院实验动物中心	8	64	3.0	8.0