烟草中一个LTR类反转录转座子基因的克隆与功能分析

• 作者: 付强 余世洲 余婧 刘筱嘉 张孝廉 林世锋 邹颉 郭玉双 陈静
• 来源期刊: 南京农业大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: LTR类反转录转座子 RACE 病毒介导的基因沉默
• 年，卷（期）: 2015,（6）
• 页码范围: 936-942
• 分类号: Q943.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.7685/j.issn.1000-2030.2015.06.010

摘要

[目的]分析烟草中LTR类反转录转座子对植物生长发育的影响.[方法]利用同源克隆及RACE的方法,从烟草栽培品种‘贵烟1号’cDNA中克隆得到了1个烟草反转录转座子的全长cDNA序列,命名为Ntrt1(GenBank登录号:KC899077).利用实时定量RT-PCR研究了该基因在烟草不同组织中的表达水平;构建了基于双生病毒卫星诱导的Ntrt1 的基因沉默载体,以中国番茄黄化曲叶病毒(tomato yellow leaf curl China virus,TYLCCNV)为辅助病毒在烟草中沉默了该基因,并调查了基因沉默后的表型.[结果]序列分析表明:该基因全长5 046 bp,编码3个ORF,分别为Gag/pol多聚蛋白、反转录转座子的中心蛋白以及一个整合酶.该基因能在烟草的根、茎、叶中表达,在叶片中的表达量最高.Ntrt1基因沉默烟草与对照相比,烟草植株明显变矮.[结论] Ntrt1在烟草的生长发育中具有重要作用.