人 PPARγ基因过表达重组腺病毒载体的构建及鉴定

• 作者: 严国强 储佳佳 李琼 李腾 沈小丹 温见炳 钟荣梅 黄起壬
• 来源期刊: 南昌大学学报（医学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 过氧化物酶体增殖物激活受体 重组腺病毒载体 基因重组 AdMax 腺病毒包装系统
• 年，卷（期）: 2015,（3）
• 所属期刊栏目: 【基础医学】
• 页码范围: 19-22,26
• 页数: 5页
• 分类号: Q754
• 字数: 3015字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13764/j.cnki.ncdm.2015.03.005

摘要

目的：构建人的过氧化物酶体增殖物激活受体（PPARγ）基因的重组腺病毒载体。方法从人脐静脉内皮细胞（HUVECs）中提取并扩增人 PPARγ cDNA 目的片段，将该目的片段经 AgeⅠ／NheⅠ酶切后插入经相同内切酶酶切后表达质粒（CMV-MCS-SV40-EGFP）得到重组穿梭质粒；再将该重组穿梭质粒与 AdMax 腺病毒包装系统的骨架质粒（pBHG loxΔE1，3 Cre）经 Cre／loxP 酶切重组，构建重组腺病毒（Ad-PPARγ）；最后，将 Ad-PPARγ感染HEK293T 细胞，进行病毒的包装、扩增、纯化及滴度检测。结果通过 PCR 鉴定及基因测序分析，PPARγ过表达重组腺病毒载体构建成功；Western blot 结果显示经包装及纯化的 Ad-PPARγ感染 HUVECs 后，可显著上调 HU-VECs 中 PPARγ基因的表达。结论 PPARγ过表达重组腺病毒载体构建成功，且能有效上调 HUVECs 中PPARγ基因的表达。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄起壬		18	144	7.0	11.0
2	李腾		3	10	1.0	3.0
3	严国强		2	4	1.0	2.0
4	李琼		1	1	1.0	1.0
5	储佳佳		1	1	1.0	1.0
6	沈小丹		1	1	1.0	1.0
7	温见炳		1	1	1.0	1.0
8	钟荣梅		1	1	1.0	1.0